Šiuo metu daugiau nei vienas milijardas pasaulio gyventojų kenčia nuo alergijos. Skaičiuojama, kad 2050 metais šis skaičius gali išaugti iki keturių milijardų. Apie 50% visų alerginėmis ligomis sergančių pacientų nustatoma I-o tipo hiperjautrumo reakcija. Tai reiškia, kad patologinį procesą sukelia paciento serume esantys specifiniai IgE antikūnai prieš įjautrinančius alergenus. 90% tokių alergenų sudaro maisto produktai, medžių bei žolių žiedadulkės ir buitiniai alergenai (namų dulkės, naminių gyvūnų epitelis). Alergiškų pacientų ligos suvaldymui bei gydymui yra ypač svarbu tiksliai nustatyti jį įjautrinantį alergeną. Tokiais atvejais ypač gelbsti itin išsamūs alergijos tyrimai.
Pagrindiniai diagnostiniai alergiškų pacientų tyrimai apima in vivo ir in vitro sistemas. In vivo tyrimams dažniausiai yra taikomas odos dūrio metodas, tuo tarpu in vitro diagnostikoje yra naudojamas specifinių IgE antikūnų nustatymas paciento kraujo mėginyje. Pastarasis alergenų tyrimas pasižymi visa eile pranašumų prieš odos dūrio tyrimą – mažiau invazyvus, nekelia grėsmės paciento sveikatai, platesnis tiriamų alergenų nustatymas vieno tyrimo metu.
Apie 98% šiuo metu rinkoje esančių in vitro diagnostinių sistemų remiasi sIgE antikūnų prieš pavienius alergenus arba fiksuoto kiekio multialergenų nustatymu. Tarp pavienių alergenų sistemų gamintojų paminėtini du – Thermo Scientific (ImmunoCAP) bei Siemens AG (Immulite). Fiksuoto kiekio multialergenų nustatymui skirtas imunobloto principu sukurtas sistemas gamina daugybė įvairių kompanijų, visgi paminėtini šiame rinkos segmente keli jų – Hitachi Chemical Diagnostics (Optigen® CLA), Euroimmun AG (Euroline), r-Biopharm AG (RIDA ql-ine®Allergy). Visos šios sistemos remiasi antigeno (alergeno) – antikūno reakcijos principu.
Kas gi yra tas antigenas/alergenas ir kokia jo reikšmė diagnostikoje?
Antigenas – tai alergeną turinti medžiaga. Kiekvienas iš šimtų kliniškai svarbių alergenų ekstraktų yra sudaryti iš daugybės atskirų alergeno baltymų, glikoproteinų ir lipoproteinų molekulių.
 |
 |
Kai kurios šių molekulių yra įvardijamos kaip pagrindiniai alergenų komponentai, kitos – kaip minoriniai. Pagrindiniai alergenų komponentai – tai molekulės, prieš kurias yra įsijautrinę ˃ 50% sergančių pacientų. Dešiniajame paveikslėlyje geltona spalva yra pavaizduota beržo, mėlyna – obuolio, raudona – lazdyno riešuto pagrindiniai alergenų komponentai.
Sąrašas gerai žinomų išgrynintų alergenų komponentų yra pateiktas duomenų bazėje www.allergen.org. Pvz. katės pleiskanų alergeno ekstrakte yra nustatyti ir patvirtinti 8 skirtingi alergeno komponentai, iš kurių 3 įvardinami kaip pagrindiniai, o likę – kaip minoriniai alergenai.
Alergenų ekstraktai, naudojami diagnostinių testų kūrime, paprastai yra gaunami iš natyvios žaliavos – alergenų šaltinio. Skirtingi gamintojai ją apdoroja skirtingais metodais. Dėl skirtingų apdorojimo būdų, alergenų ekstraktų sudėtis skiriasi, todėl alergenų ekstraktai įvardijami kaip nestabiliausias IgE testo komponentas. Tai lemia ir tyrimų rezultatus – su skirtingų gamintojų atliktomis test sistemomis, to paties paciento serume aptinkami specifinių IgE rezultatai gali ženkliai skirtis.
UAB „Imunodiagnostika“ laboratorija atliko palyginamąją studiją ir ištyrė žinomą paciento kraujo serumą su trimis skirtingų gamintojų diagnostinėmis sistemomis. Šių gamintojų tiekiamais diagnostiniais rinkiniais yra tiriami Lietuvos gyventojai. Rezultatai pavaizduoti žemiau pateiktoje lentelėje:
| Motiejukas | Katė | Menkė | Kviečiai | Pienas | Pomidoras | |
| A gamintojas | 2 | 3 | 0 | 2 | 2 | 2 |
| B gamintojas | 2 | 2 | 0 | 2 | 1 | 2 |
| C gamintojas | 1 | 0 | 0 | 0 | 2 | 2 |
Rezultatai pateikti pagal įsijautrinimo klases. B gamintojas – tai „auksiniu“ standartu pasaulyje pripažintas gamintojas. Šio gamintojo testais atlikti alerginiai tyrimai yra labiausiai sutampantys su paciento ligos simptomais. Šiuo standartu pripažinti ir Allergomedica klinikoje atliekami molekuliniai alergenų tyrimai.
Gautus skirtumus tarp skirtingų gamintojų galima iš dalies paaiškinti skirtingais alergenų ekstraktais, naudojamais diagnostinių testų gamyboje. Nors kiekvienas gamintojas yra standartizavęs savo gamyboje alergenų ekstraktų gavimo iš žaliavos procedūras, visgi praktiškai neįmanoma gauti identiškos sudėties ekstraktų. Skirtumus įtakoja biologinė augalų įvairovė bei įvairios priemaišos. Alergenų sudėtis gali skirtis ir tarp skirtingų alergenų ekstraktų partijų.
Taigi, alergenų ekstraktų standartizavimas yra be galo svarbus, siekiant sukurti kokybiškus diagnostinius rinkinius. Biotechnologijoms sparčiai žengiant į priekį atsiranda galimybė alergenų ekstraktų standartizavimui taikyti įvairias šiuolaikines technologijas – baltymų elektroforezę, imunobloto, masių spektrometrijos analizes.
Pavyzdyje - motiejuko alergeną turinčių reagentų kokybės vertinimas. UAB „Imunodiagnostika“ mokslo padalinio tyrimų rezultatai:
 |
 |
|
| A | B | |
 |
 |
 |
| C | C | C |
 |
||
| C | ||
A. Motiejuko ekstraktų ir atskirų alergeno komponentų tyrimas NDS elektroforeze.
B. Reagentų imuninio aktyvumo vertinimas imunobloto analize.
C. Atskirų alergeno komponentų tyrimas masių spektrometrijos analize.
Paminėti metodai leidžia visapusiškai įvertinti alergeną turinčių reagentų kokybę bei sukurti maksimaliai jautrią bei specifišką alergijų diagnostikos sistemą. Kokybiška diagnostinė sistema – tai raktas į tikslią paciento diagnozę bei tolimesnį gydymą.
Norintiems kokybiškos situacijos analizės, dažniausiai rekomenduojami molekuliniai alerginiai tyrimai, kuriuos galima atlikti Allergomedica klinikoje, o kraują priduoti ne tik sostinėje, bet ir įvairiose vietovėse esančiose partnerių klinikose.
Šie alergijos tyrimai vaikams ir suaugusiems ypač patinka ne tik dėl tikslumo, bet ir dėl efektyvumo, kadangi patiems galima pasirinkti vietą, kur bus atliktas kraujo tyrimas alergijai nustatyti, o rezultatai greitu metu yra atsiunčiami elektroniniu paštu.
Asta Miškinienė, biomedicinos mokslų daktarė
UAB „Imunodiagnostika“ mokslinių tyrimų ir vystymo vadovė
